美軍中央司令部（Centcom）表示，週一（5月25日）在伊朗南部對伊朗的飛彈設施以及試圖佈設水雷的船隻進行了打擊，並稱這些行動為「自衛性攻擊」。 伊朗外交部則表示，美國在荷爾木茲甘省（Hormozgan）採取的「具侵略性且毫無正當理由的行動」，其後果應由美方承擔。該地區擁有霍爾木茲海峽沿岸海岸線，這條重要的水道目前已被伊朗封鎖，導致全球能源價格飆升。 伊朗聲明表示：「毫無疑問，伊朗伊斯蘭共和國絕不會對任何惡行坐視不理，並且不會猶豫採取行動捍衛伊朗人民。」 美國與以色列於2月28日對伊朗發動戰爭，以一連串致命攻擊揭開序幕，其中包括一次導致該國最高領袖身亡的襲擊。
美軍中央司令部在聲明中表示，美軍「今日在伊朗南部進行自衛性打擊，以保護我方部隊免受伊朗部隊所構成的威脅」。 聲明未具體說明空襲發生的地點，但《紐約時報》引述一名官員指出，目標為阿巴斯（Bandar Abbas）附近地區——這是伊朗南部的一座港口城市，同時也是伊朗海軍基地所在地，坐落於霍爾木茲海峽沿岸。 伊朗伊斯蘭革命衛隊（IRGC）其後表示，已擊落一架美國無人機，並向一架進入伊朗領空的戰鬥機開火，但未具體說明事件發生的時間。 特朗普（Donald Trump，川普）上週末曾暗示協議已接近完成，但隨後又表示，他已指示談判代表「不要急於達成」協議。
根據美國媒體報導，該潛在協議並非最終解決方案，而是一份諒解備忘錄，據稱包括將停火再延長60天、重開海峽，以及就伊朗核計劃展開進一步談判的安排。 一名知情官員向路透社透露，伊朗央行行長已出席週一在多哈舉行的會談，討論凍結資產問題，而討論重點主要集中在伊朗高濃縮鈾的庫存，以及霍爾木茲海峽的相關情況。 美國中央司令部發言人提姆·霍金斯（Tim Hawkins）上尉表示，美軍「在持續停火期間仍保持克制，同時持續保衛我方部隊」。 這些打擊發生之際，伊朗外交部發言人伊斯梅爾·貝卡伊（Esmaeil Baqaei）表示，與美國的談判已有部分進展，但要達成結束衝突的協議「並非迫在眉睫」。
根據《紐約時報》報導，霍金斯上尉表示，這次打擊的目標是位於伊朗南部港口城市阿巴斯港（Bandar Abbas）附近的一處地區。阿巴斯港坐落於霍爾木茲海峽，是伊朗海軍基地所在地。 5月初，伊朗和美國海軍驅逐艦在霍爾木茲海峽發生衝突，雙方互相指責對方挑起事端，但特朗普仍然堅稱停火協議仍然有效。 在空襲後，美國國務卿馬可·盧比奧（Marco Rubio）表示，協議仍有可能達成，並提到伊朗首席談判代表與外交部長週二與卡塔爾首相的會談。 盧比奧在對印度訪問期間告訴記者：「我們會看看能否取得進展。我認為目前雙方正在就初步文件中的特定措辭反覆磋商，因此還需要幾天。」
當稍後再次被問及週一的襲擊時，盧比奧表示：「這些海峽必須保持開放。無論如何，它們都將會保持開放，因此它們必須開放。那裡正在發生的事情是違法的，是非法的，對世界而言是不可持續的，也是不可接受的。」 BBC合作夥伴美國哥倫比亞廣播公司報導稱，美國情報部門認為伊朗最高領袖穆吉塔巴·哈梅內伊（Mojtaba Khamenei）——他在戰爭第一天遭以色列攻擊受傷，其父親兼前任領袖在該次攻擊中身亡——目前藏身於一處未公開地點，使他與特使之間的溝通困難，因而延緩與美國的談判進度。 據美國媒體報導，這些討論不會立即導致最終協議。具爭議性的議題可能在之後談判，包括伊朗要求制裁解除的細節、呼籲釋放的凍結資金，以及美國要求伊朗限制其核計劃的具體措施。 戰爭爆發之初，伊朗被認為擁有約440公斤（970磅）濃縮至60%純度的鈾——距離武器級的90%僅需短暫的濃縮程序，理論上足以製造核武。
週一晚間，特朗普表示，這些濃縮鈾將「立即」移交給美國，或「最好是在與伊朗伊斯蘭共和國協調下，就地銷毀」。
